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基于BME培养基所诞生的DMEM培养基

发布时间:2021/8/11 16:25:45      阅读次数:364

  DMEM培养基的诞生是在BME培养基基础上,使氨基酸和维生素浓度均增加4倍,并额外补充非必需氨基酸(甘氨酸和丝氨酸)、柠檬酸铁、丙酮酸等成分;葡萄糖浓度可提高至25mM(高糖),DMEM多用于哺乳动物贴壁细胞的培养。
  特点:
  -GMP级别,含有丙酮酸钠和1000mg/L的葡萄糖;
  -用于多种哺乳动物贴壁培养,如:成纤维细胞、Hela、293等实体瘤细胞;
  -不含蛋白质、脂类和生长因子,需要添加胎牛血清或培养添加物后使用。
  -RPMI 1640培养基是专为淋巴样细胞培养而设计的,(Roswell Park Medical Institute,RPMI)G.E. Moore在5A培养基基础上,在维持无机盐浓度和培养基渗透压的前提下,主要对氨基酸、钙和镁浓度进行优化,开发出用于培养淋巴细胞的RPMI 1640培养基。
  DMEM培养基中各种组分的作用及添加依据:
  Hepes(羟乙基哌倩乙硫磺酸,238.3):25mM/L(5.9575g/L),不加碳酸氢钠时pH为6.7±0.3,加碳酸氢钠时pH为7.0±0.3。单独配制时,配制为100X即0.6g/ml。配制2.5M/L(0.6g/mL)Hepes:12g的Hepes定容到20mlPBS中,过滤除菌,分装为1ml/管,-20C保存。Cell Biology建议为4℃保存。
  HEPES是一种非离子缓冲液,在pH7.2-7.4范围内具有较好的缓冲能力,但是非常昂贵,在高浓度时对一些细胞可能有毒.HEPES缓冲液可与低水平的碳酸钠(0.34g/L)共用,以抵消因额外加入HEPES引起的渗透压增加,在这种培养条件下,细胞培养瓶的盖子应拧紧,以防止培养液中所需的少量碳酸盐散入空气中。
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