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如何避胎牛血清中产生沉淀?

发布时间:2022/3/30 11:02:42      阅读次数:415

  胎牛血清可提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物;提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调变它们所结合的物质活力;有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒的作用;该血清还是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子的来源,为其提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。
  胎牛血清中包含絮状沉淀,它们是什么,怎么处理?
  沉淀包含纤维蛋白和脂蛋白。这是正常特性,不会影响产品性质。要除去沉淀,离心血清(400g,1-2分钟)或者简单的让其沉淀在瓶子底部,将血清小心的转移到另一个无菌瓶里(一般不建议采用过滤的方法除去沉淀,因为沉淀会堵塞滤膜而无法过滤)。大多情况轻轻摇动沉淀并加热至37℃就会再溶解。所以,使用产品时要摇动并加热血清至37℃,沉淀会自然消失。
  如何避胎牛血清中产生沉淀?按如下操作可避免沉淀的产生:
  (1)解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。
  (2)血清分装冻存时,须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一。
  (3)勿直接由-20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。
  (4)勿将血清置于37℃太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中许多较不稳定的成份也会因此受到破坏,从而影响血清的品质。
  (5)血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。
  (6)若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。
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