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分析透析胎牛血清的生产工艺

发布时间:2021/8/20 11:24:36      阅读次数:282

   透析胎牛血清主要用于可能需要关注小分子浓度的特殊研究.这主要包括四个领域:蛋白质组学 同位素标记 细胞通讯以及报告基因细胞系的筛选,其中有些领域是相互交叉的.

  分析透析胎牛血清的生产工艺:
  a. 透析胎牛血清是在胎牛血清的基础上进行加工的.
  胎牛血清在无菌条件下要经过0.1微米膜三重过滤,要进行一系列的检测,包括理化性质检查(如渗透压和pH值),成分检查(如内毒素和血红蛋白) 外源因子检查(如细菌 病毒和支原体)以及促进细胞增殖的检查等.
  透析胎牛血清为保证其性能和安全性,也需具备胎牛血清的这些工艺和检查.
  b. 透析胎牛血清,顾名思义,需经过透析.它是在4°C下用特定的透析膜对血清在0.15M NaCl中透析.由于该透析膜只允许10 kDa以下的小分子穿过,在渗透压的作用下,这些小分子便从血清中渗析到透析膜外的NaCl溶液中.10 kDa以下的小分子有化学小分子 核苷酸 某些激素 盐 低分子量蛋白质 氨基酸 细胞因子 葡萄糖 残留抗生素和其他外源分子.那么透析的效果如何?以及透析到何时呢?由于不可能监测全部小分子,因此常选用葡萄糖为代表.血清中葡萄糖<5 mg/dL,即可以停止透析了.透析过程中,除监测葡萄糖浓度外(可采用葡萄糖氧化酶方法测定),还需仔细监测pH值和渗透压.
  c. 该透析采用的是切向流过滤(tangential flow filtration).切向流是指液体流动方向与过滤方向呈垂直方向的过滤形式.该方式使液体流动在滤膜表面产生剪切力,减小了滤膜上的物质堆积,保证了稳定的过滤速度.
  透析胎牛血清对培养中的细胞起到某些保护作用:有一些细胞,如内皮细胞 骨髓样细胞可以释放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用.这种作用是偶然发现的,现在则有目的的使用血清来终止胰蛋白酶的消化作用.因为胰蛋白酶已经被广泛用于贴壁细胞的消化传代.血清蛋白形成了血清的粘度,可以保护细胞免受机械损伤,特别是在悬浮培养搅拌时,粘度起到重要作用.血清还含有一些微量元素和离子,他们在代谢解毒中起重要作用,如SeO3,硒等.
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