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DB3.1 感受态

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 产品简介:

本公司生产的大肠杆菌 DB3.1 细胞含有 gyrA462 基因,对 λ 噬菌体的 ccdB 基因产物的毒性具有抵 抗作用,特别适用于转化和扩增包含 ccdB 基因的质粒载体。使用 pUC18 质粒检测,转化效率可达 107 cfu/μg DNA.,-80 ℃ 保存几个月转化效率不发生改变。每支感受态可以酌情分装使用,降低 了实验的成本。质量稳定,使用方便,质优价廉。

产品组成组分:

CC96182-01 CC96182-02 CC96182-03 DB3.1 感受态细胞 10 × 100 μL 100 × 100 μL

定制基因型:

F- gyrA462 endA1 Δ(sr1-recA) mcrB mrr hsdS20(rB-, mB-) supE44ara-14 galK2 lacY1 proA2 rpsL20(SmR) xyl-5 λ- leu mtl1

存储条件:

-80 ℃保存;请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。 产品特性 - DB3.1 感受态细胞具有链霉素抗性

质量控制:

无外源质粒 DNA 残留; 化学法转化效率≥107 cfu/μg pUC18 DNA。

使用方法:

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化;

2. 将待转化 DNA 加入到 100μL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30min;

3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90s 后,立刻置于冰水浴中静置 2-3 min;

4. 向离心管中加入 900μL LB 或 SOC 培养基(室温或 37 ℃预热),然后置于 37 ℃摇床复壮 45 min;

5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于 37 ℃培养箱培养过夜。

注意事项 :

1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用;

2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10;

3. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可;

4. 为确保最高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔

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