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DH5α感受态

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 DH5α感受态产品简介 本品为使用大肠杆菌 DH5α 菌株制备的高效化学感受态细胞,转化效率可达 108 cfu/μg DNA,被广 泛用于质粒转化、基因克隆等;可以使用蓝白斑筛选。 产品组成 组分 CC96102-01 CC96102-02 CC96102-03 DH5α 感受态细胞 10 × 100 μL 100 × 100 μL 定制 基因型: F - φ80lacZΔM15 Δ(lacZYA-argF) U169 recA1 endA1 hsdR17(rk - , mk + ) phoA supE44 thi-1 gyrA96 relA1 λ存储条件 -80 ℃保存;请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。 产品特性 -该菌株的重组率较低,故常用于克隆质粒的保存; -蓝白斑筛选时,需在平板上预先涂布 IPTG 和 X-gal; -属于 E. coli K12 系列,可用于基因克隆等;不可用于以 T7 RNA 聚合酶为表达系统的蛋白表达。 质量控制 无外源质粒 DNA 残留; 化学法转化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。 使用方法 1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化; 2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30 min; 3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90 s 后,立刻置于冰水浴中静置 2-3 min; 4. 向离心管中加入900 μL LB或SOC培养基(室温或37 ℃预热),然后置于37 ℃摇床复壮45 min; 5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于 37 ℃培养箱培养过夜。 注意事项 1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用; 2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10; 3. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可; 4. 为确保最高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。

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