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JM108 感受态

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 产品简介:

JM108 来源于 JM106 菌株,最初是作为黏粒文库的宿主被改造而成。 JM108 菌株缺失核酸内切酶 (endA),提高了质粒 DNA的产量和质量;重组酶缺陷型 (recA)减少插入片段的同源重组概率,保证 了插入 DNA 的稳定性。JM108 菌株最大的特点是扩繁质粒产量大,纯度高,且质量稳定,特别是 超螺旋质粒比例较高,超螺旋质粒所占比例一般>90%(gyrA96 突变型说明 JM108 菌株的 DNAgyrase 基因被突变,导致拓扑异构酶Ⅱ的功能受影响,增加了超螺旋质粒的比例),非常适合后续 的动物细胞转染实验(超螺旋质粒可提高细胞转染的效率)。此外该菌株具有萘啶酮酸抗性。吐 露港生物开发的 JM108 感受态细胞经特殊工艺制作,pUC18 质粒检测转化效率 108 cfu/μg DNA。

产品组成组分:

CC96191-01 CC96191-02 CC96191-03 JM108 感受态细胞 10 × 100 μL 100 × 100 μL。

定制基因型:

F - endA1 recA1 gyrA96 thi-1 relA1 glnV44 Δ(lac-proAB) hsdR17 (rK - mK + )。

存储条件:

-80 ℃保存;请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

质量控制 :

无外源质粒 DNA 残留; 化学法转化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。

使用方法 :

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化;

2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30 min;

3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90s 后,立刻置于冰水浴中静置 2-3 min;

4. 向离心管中加入 900μL LB 或 SOC 培养基(室温或 37 ℃预热),然后置于 37 ℃摇床复壮 45 min;

5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于 37 ℃培养箱培养过夜。

注意事项:

1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用;

2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10;

3. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可;

4. 为确保最高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。

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