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Stbl4 感受态

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 产品简介:

Stbl4 电转化大肠杆菌细胞是 Stbl2 细胞的衍生物,非常适合克隆不稳定插入物,如逆转录病毒序列、 直接重复序列和串联阵列基因。此外, Stbl4 细胞可用于使用质粒衍生载体产生 cDNA 文库,并能 够吸收和维持大质粒(例如 50kb 粘粒和 100 - 200 kb P1 克隆)。Stbl4 细胞还含有一个 F’附加体,允 许它们作为单链 DNA 的宿主,如 M13mp 克隆载体。由于携带 lacZΔM15 突变,因此该菌可用于含 Xgal 和 IPTG 的琼脂平板上菌落的蓝/白斑筛选。mcrA 突变和 mcrBC - hsdRMS - mrr 缺失允许克隆甲 基化的基因组序列。最后,endA1 突变大大提高了质粒产量和质量。经 pUC18 转化检测,Stbl4 感 受态细胞的效率可达 108 cfu/μg DNA。

产品组成组分:

CC96135-01 CC96135-02 CC96135-03 Stbl4 感受态细胞 10 × 100 μL 100 × 100 μL

定制基因型:

mcrA Δ(mcrBC-hsdRMS-mrr) recA1 endA1 gyrA96 galthi-1 supE44 λrelA1 Δ(lac-proAB)/F' proAB+lacI qZΔM15 Tn10 (TetR)

存储条件 :

-80 ℃保存,请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

质量控制:

无外源质粒 DNA 残留; 化学法转化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。

使用方法:

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰浴中融化;

2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30 min;

3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90 s 后,立刻置于冰浴中静置 2-3 min;

4. 向离心管中加入900 μL LB或SOC培养基(室温或37 ℃预热),然后置于37 ℃摇床复壮45 min;

5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于 37 ℃培养箱培养过夜。

注意事项:

1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用;

2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10;

3. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可;

4. 为确保最高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。

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