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XL1-Blue MRF' Kan 感受态

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 产品简介:

XL1-Blue MRF'Kan 菌株来源于 XL1-Blue 株系,属于限制酶系统缺失型菌株,且具有卡那霉素抗性 (KanR)。recA1和endA1基因的突变有利于插入外源DNA片段的稳定性和高纯度质粒DNA的提取。 hsdR17 突变导致 EcoK 核酸内切酶系统缺失,同样提高了外源 DNA 的稳定性和提取质量。 lacIqZΔM15 的存在使 XL1-Blue MRF’Kan 菌株可用于蓝、白斑筛选实验。XL1-Blue MRF'Kan 感受 态细胞经特殊工艺制作,pUC18 质粒检测转化效率>108 cfu/μg DNA。

产品组成组分 :

CC96155-01 CC96155-02 CC96155-03 XL1-Blue MRF' Kan 感受态细胞 10 × 100 μL 100 × 100 μL。

定制基因型:

∆(mcrA)183 ∆(mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lac [F´proAB lacIqZ∆M15 Tn5 (KanR)]。

存储条件 :

-80 ℃保存;请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

质量控制:

无外源质粒 DNA 残留; 化学法转化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。

使用方法 :

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化;

2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30 min;

3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90s 后,立刻置于冰水浴中静置 2-3 min;

4. 向离心管中加入 900μL LB 或 SOC 培养基(室温或 37 ℃预热),然后置于 37 ℃摇床复壮 45 min;

5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于 37 ℃培养箱培养过夜。

注意事项 :

1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用;

2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10;

3. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可;

4. 为确保最高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。

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