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产品简介:
XL1-Red 具有良好的重组能力(recA+),但在丰富培养基(如 LB)中生长极慢,繁殖时间为 90- 120 min。XL1-Red 携带编码四环素抗性基因的 TN10 转座子;因此,产生的转化物可能不具有四 环素抗性。然而,由于快速的突变型,细胞将经常产生四环素敏感(Tets)变体。经 pUC18 质粒转 化检测,XL1-RED 感受态细胞的转化效率可达 106 cfu/μg DNA。
产品组成组分:
CC96168-01 CC96168-02 CC96168-03 XL1-RED 化学感受态细胞 10 × 100 μL 100 × 100 μL
定制基因型:
endA1 gyrA96 thi-1 hsdR17 supE44 relA1 lac mutD5 mutS mutT Tn10 (TetR)
存储条件:
-80 ℃保存;请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
质量控制 :
无外源质粒 DNA 残留; 化学法转化效率≥106 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法 :
1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰浴中融化;
2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30 min;
3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90s 后,立刻置于冰浴中静置 2-3 min;
4. 向离心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培养基(室温或 37 ℃预热),后置于 37 ℃摇床复壮 45 min;
5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于 37 ℃培养箱培养过夜。
注意事项:
1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用;
2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10;
3. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可;
4. 为确保最高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。