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B834 感受态

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 产品简介 :

B834 是 BL21 菌株的父系菌株。该系列宿主菌是蛋氨酸缺陷型,可以用来高水平、高特异性地使用 35S-蛋氨酸和硒代蛋氨酸来标记目的蛋白,以用于蛋白质晶体结构的研究。B834 宿主菌也是 Lon 和 OmpT 蛋白酶缺陷型菌株。B834 (DE3)菌株可表达 T7 RNA 聚合酶,因此适用于 pET 系列及其他 T7 启动子系列的载体。经 pUC18 质粒转化检测,B834 (DE3)感受态细胞的转化效率可达 107 cfu/μg DNA。

产品组成组分:

CC96126-01 CC96126-02 CC96126-03 B834 (DE3) 化学感受态细胞 10 × 100 μL 100 × 100 μL。

定制 基因型:

F - ompT hsdSB (rB - mB - ) gal dcm met (DE3)。

存储条件 :

-80 ℃保存;请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

质量控制:

无外源质粒 DNA 残留; 化学法转化效率≥107 cfu/μg pUC18 DNA。

使用方法:

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰浴中融化;

2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30 min;

3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90s 后,立刻置于冰浴中静置 2-3 min;

4. 向离心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培养基(室温或 37 ℃预热),后置于 37 ℃摇床复壮 45 min;

5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板,于 37 ℃培养箱培养过夜。

注意事项:

1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用;

2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10;

3. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可;

4. 为确保最高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。

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