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产品简介:
JM109(DE3)菌株来源于 JM109,用于高效表达克隆于含有噬菌体 T7 启动子的表达载体(如 pET 系 列)的基因。λ 噬菌体 DE3 区含有 T7 噬菌体 RNA 聚合酶,
该区整合于 JM109 的染色体上,所以称 为 JM109(DE3)。可同时表达 T7 RNA 聚合酶和大肠杆菌 RNA 聚合酶,用于 pET 系列,pGEX, pMAL 等质粒的蛋
白表达。JM109(DE3)菌株不可用于蓝白斑筛选试验。经 pUC18 质粒转化检测, JM109(DE3)感受态细胞的转化效率可达 108 cfu/μg DNA。
产品组成组分:
CC96166-01 CC96166-02 CC96166-03 JM109(DE3) 化学感受态细胞 10 × 100 μL 100 × 100 μL 定制 基因型:endA1 recA1 gyrA96 thi-1 hsdR17 (rk - mk + )
relA1 supE44 Δ(lac-proAB) [F´ traD36 proAB laqIqZΔM15](DE3)
存储条件:
-80 ℃保存;请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
质量控制:
除 pRARE 外,无外源质粒 DNA 残留; 化学法转化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法:
1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰浴中融化;
2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30 min;
3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90s 后,立刻置于冰浴中静置 2-3 min;
4. 向离心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培养基(室温或 37 ℃预热),后置于 37 ℃摇床复壮 45 min;
5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于 37 ℃培养箱培养过夜。
注意事项:
1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用;
2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10;
3. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可;
4. 为确保最高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。