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Rosetta-gami 2 感受态

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 产品简介

Rosetta-gami 2 系列菌株是集合了 Rosetta 2 系列菌株和 Origami 2 系列菌株的有点,增强了细胞内 二硫键的形成和含有在大肠杆菌中稀有密

码子的真核细胞蛋白的表达能力。Rosetta-gami 2 系列菌 株是来源于 Origami 2 系列菌株。而 Origami 2 系列菌株是卡那敏感的 K-12 细胞菌

株,携带有 TrxB 和 Gor 基因突变提高含二硫键正确折叠蛋白的高效表达。Rosetta-gami 2 感受态细胞经特殊工艺制 作,pUC18 质粒检测转

化效率>108 cfu/μg DNA。

产品组成组分

CC96145-01 CC96145-02 CC96145-03 Rosetta-gami 2 感受态细胞 10 × 100 μL 100 × 100 μL

定制基因型

Δ(ara-leu)7697 ΔlacX74 ΔphoA PvuII phoR araΔ139 ahpC galE galK rpsL F’[lac+ lacIq pro] gor522::Tn10 trxB pRARE2 (CamR , StrR , TetR )。

存储条件

-80 ℃保存;请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

质量控制

无外源质粒 DNA 残留; 化学法转化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。

使用方法

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化;

2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30 min;

3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90s 后,立刻置于冰水浴中静置 2-3 min;

4. 向离心管中加入 900μL LB 或 SOC 培养基(室温或 37 ℃预热),然后置于 37 ℃摇床复壮 45 min;

5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于 37 ℃培养箱培养过夜。

注意事项

1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用;

2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10;

3. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可;

4. 为确保最高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。

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