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产品简介
Rosetta-gami B 系列菌株来源于 Origami B 系列菌株，是集合了 BL21 系列、Rosetta 系列和 Origami 系列菌株的优点。菌株含有
pLacIRARE 质粒，能够提供原 Rosetta(DE3)宿主菌含有的 AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, 和 GGA 六个稀有密码子的 tRNA，提高
了真核细胞蛋白在大肠杆菌中的表达水 平。在 thioredoxin reductase (trxB)和 glutathione reductase (gor)基因上同时含有突变，这
使得该菌株 能够更加高效地在细胞质内生成二硫键，有助于表达含二硫键的活性蛋白。菌株带有氯霉素、卡 那和四环素抗性，无
法用于转化含这些抗性的质粒。Rosetta-gami B(DE3)系列菌株含有溶源的 λDE3，可以表达 T7 RNA 聚合酶，适用于 pET 系列载
体及其他 T7 启动子系列载体。此外， pLacIRARE 质粒能够额外表达 lac 转录抑制蛋白，从而抑制了 lac 启动子的本底表达水平。
pLacIRARE 质粒的起始复制位点是 p15 Origin, 这使得该质粒能够和 pUC-及 pBR322-衍生的质粒互 相共存。经 pUC18 质粒转化
检测，Rosetta-gami B(DE3)感受态细胞的转化效率可达 107 cfu/μg DNA 以上。
产品组成组分
CC96119-01 CC96119-02 CC96119-03 Rosetta-gami B (DE3) pLacI 化学感受态细胞 10 × 100 μL 100 × 100 μL
定制 基因型
F - ompT hsdSB (rB -mB - ) gal dcm lacY1 ahpC (DE3) gor522::Tn10 trxB pLacIRARE (CamR, KanR, TetR)
存储条件
-80 ℃保存；请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
质量控制
除 pLacIRARE 质粒外，无外源质粒 DNA 残留； 化学法转化效率≥107 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；
2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育 30 min；
3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中，不要晃动，热激 90s 后，立刻置于冰水浴中静置 2-3 min；
4. 向离心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培养基（室温或 37 ℃预热），后置于 37 ℃摇床复壮 45 min；
5. 取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于 37 ℃培养箱培养过夜。
注意事项
1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用；
2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10；
3. 加入待转化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受态细胞，仅用手指轻弹即可；
4. 为确保最高转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔。
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