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产品简介
发根农杆菌是根瘤菌科(Rhizobiaceae)农杆菌属(agrobacterium)的一种革兰氏阴性土壤细菌,它能够 感染大多数双子叶植物和少数单子叶植物以及个别裸子植物。C58C1 发根农杆菌菌株含有 pRiA4b 农杆碱型 Ri 质粒,具有广泛的宿主范围(蔷薇科,夹竹桃科,豆科,茄科,黄芩,烟草等),同 时具有链霉素,利福平抗性。本公司生产的 C58C1 化学转化感受态细胞经特殊工艺制作, pCAMBIA2301 质粒(卡那霉素抗性)检测,转化效率≥ 104 cfu/μg DNA。
产品组成 组分
CC96313-01 CC96313-02 CC96313-03 C58C1 化学感受态细胞 10 ×100 μL 100 ×100μL
定制基因型
Agrobacterium rhizogenes (StrR ,RifR ) pRiA4b (agropine type)
存储条件
-80 ℃保存; 请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。 质量控制 除农杆碱型 Ri 质粒 pRiA4b 外,无外源质粒 DNA 残留 化学法转化效率≥104 cfu/μg DNA。
使用方法
1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,在手心融化成冰水混合物,置于冰水浴中;
2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中,用手拨打管底混匀,依次于冰上静置 10 分钟、液氮 5 分 钟(或干冰乙醇浴和-80℃冰冻)、37 ℃水浴 5 分钟、冰浴 5 分钟;
3.加入 900 μl 无抗生素的 YEB 液体培养基,于 28℃振荡培养 2~3 小时;
4. 6000 rpm 离心一分钟收菌,留取 100 μl 左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的 YEB 平板 上,倒置放于 28 ℃培养箱培养 2-3 天。
注意事项
1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用;
2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10;
3.C58C1 具有链霉素、利福平抗性,不可用于具有链霉素抗性或利福平抗性质粒的转化。